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ELISA避免“花板"出現(xiàn)的措施之陰陽性對照的選擇
ELISA實驗是一種靈敏度高，特異性強，重復(fù)性好的實驗診斷方法，ELISA實驗中有很多因素影響著實驗結(jié)果，導(dǎo)致出現(xiàn)“花板"問題。為了避免“花板"問題的出現(xiàn)，降低檢測的假陽性率，獲得更理想的實驗結(jié)果，BUNSEN本生技術(shù)小編建議：先我們在選擇ELISA試劑時，應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、價格操作方便、省時的試劑。并在檢驗的過程中應(yīng)采取下列措施:
(1)檢測之前，加大離心轉(zhuǎn)速，盡量延長時間，使血細胞和纖維蛋白充分沉淀，讓血細胞與血清分離。
(2)抽取樣本時應(yīng)抽出足夠檢驗量的血液標(biāo)本，選擇無添加劑的真空試管。
(3)血液標(biāo)本應(yīng)置于室溫下1～2h，使血液凝固收縮，然后離心檢測或讓血液過夜后再檢測。這樣才能使得血液充分收縮，讓標(biāo)本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽性率降至低。
(4)加樣時不能加入紅細胞或纖維蛋白，要按照操作說明書去做，否則會影響實驗結(jié)果。
(5)封板溫育時，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
(6)手工洗板時應(yīng)注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出，連成整體液面后產(chǎn)生“花板"。
(7)洗液的溫度也會影響洗板的干凈程度，尤其是冬天溫度過低時容易出現(xiàn)“花板"問題。
(8)用洗板機洗板時應(yīng)防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
Elisa試劑盒之陰陽性對照的選擇：
做ELSIA實驗時，會遇到很多問題，ELISA實驗中最常見問題的就是陰陽性對照應(yīng)該如何選擇。
1、如何選擇合適的陽性對照?
陽性對照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，一般陽性對照多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如，以人血清為標(biāo)本的測定，陽性對照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。
2、如何選擇合適的陰性對照?
陰性對照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，先檢測確定其中不含待檢物質(zhì)。比如，檢測人血清標(biāo)本時，陰性對照應(yīng)該選擇正常人血清。檢測免疫動物血清中抗體效價時，陰性對照應(yīng)該選擇該動物的免疫前血清。
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