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ELISA試劑盒的靈敏度該如何判定?
ELISA試劑盒的靈敏度判定需結(jié)合以下關鍵指標和方法綜合評估：
一、靈敏度的定義與核心指標?
檢測限(LOD)?
指能可靠檢測到目標物的低濃度，計算公式為：
LOD = 空白信號均值(Sb) + 3 × 空白信號標準差(σ)? ?。
實際應用中，試劑盒說明書常標注“靈敏度"即對應LOD(如10pg/mL)?。
定量限(LOQ)?
可準確定量的低濃度，計算公式為：
LOQ = Sb + 10 × σ? ?。
通常要求信號變異系數(shù)(CV)≤20%，確保結(jié)果可重復?。
二、判定方法?
標準曲線驗證?
選擇低濃度標準品(如LOD附近濃度)，重復檢測3次，計算信號強度與背景噪聲的比值(S/N≥3為合格)?。
加標回收率測試?
在樣本中添加已知濃度的目標物，檢測回收率應在80%-120%范圍內(nèi)?。
示例：若添加50pg/mL標準品，測得濃度為45-55pg/mL則符合要求。
稀釋線性實驗?
對樣本進行梯度稀釋，檢測信號值與理論值的偏差應≤20%?。
三、實驗優(yōu)化建議?
樣本處理?：避免反復凍融，離心去除干擾物?。
對照設置?：同步檢測空白對照(僅緩沖液)和陰性樣本，確認無交叉反應?。
數(shù)據(jù)分析?：優(yōu)先選擇線性范圍內(nèi)(R2≥0.99)的數(shù)據(jù)點計算濃度?。
四、常見誤區(qū)?
混淆“靈敏度"與“檢測范圍"：靈敏度是LOD，而檢測范圍是標準曲線的線性區(qū)間(如30-900pg/mL)?。
忽略批間差異：板內(nèi)變異系數(shù)應<5%，板間變異系數(shù)應<15%?。
通過上述方法可系統(tǒng)評估試劑盒靈敏度，確保實驗數(shù)據(jù)的可靠性。
注：以上資料僅供參考，如需進一步了解產(chǎn)品詳情，可參考品牌供應商或技術老師。
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