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?人高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書主要包括以下內(nèi)容?：
一、實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)原理。預(yù)先包被高遷移率族蛋白1(HMG-1)抗體的微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌后，用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中的HMG-1濃度呈正相關(guān)。通過酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，可以計(jì)算樣品濃度?。
二、試劑盒組成
試劑盒通常包括酶標(biāo)板、酶標(biāo)抗體工作液、標(biāo)本稀釋液、濃縮洗滌液、標(biāo)準(zhǔn)品、底物工作液等組件，具體組成可能因不同品牌而有所差異。這些組件需在2-8℃條件下保存?。
三、樣品收集、處理及保存
血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液，離心分離血清和紅細(xì)胞，取上清檢測(cè)或凍存于-20℃/-80℃?。
血漿：使用EDTA、檸檬酸鹽或肝素作為抗凝劑，離心取上清檢測(cè)或凍存?23。
其他樣本如細(xì)胞上清液、組織勻漿等也需經(jīng)過適當(dāng)處理后方可檢測(cè)?25。
四、實(shí)驗(yàn)步驟
提前從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。
配制洗滌液，將濃縮洗滌液按一定比例稀釋。
按照說明書操作，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)抗體等，進(jìn)行溫育和洗滌。
加入底物TMB顯色，并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)加入終止液。
使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度?。
五、注意事項(xiàng)
試劑盒需保存在2-8℃，使用前需室溫平衡。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中密封保存。
嚴(yán)格按照說明書中的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行操作。
所有液體組分使用前需充分搖勻?。
六、自備物品
進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)還需自備一些實(shí)驗(yàn)器材，如酶標(biāo)儀(450nm)、高精度加樣器及槍頭、37℃恒溫箱等?。
請(qǐng)嚴(yán)格按照本說明書進(jìn)行操作，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。如有任何疑問或問題，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系供應(yīng)商或?qū)I(yè)技術(shù)人員進(jìn)行咨詢。
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